CRP作为检测指标， 根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)EP系列文件及我国卫生行业检验相关文件要求，从分析仪的精密度、准确度、正确度、稀释度、线性范围、携带污染率、等性能指标,评价MAGICL6000全自动化学发光分析仪并将其与西门子特定蛋白仪进行比较。结果 批内精密度的变异系数(CV)分别为 0.51%、3.47%,批间精密度的 CV 分别为 1.6 6%、5.1 4%,均<±7.5%[1/4系统总误差（Tea）]; 正确度:使用的参考物质水平均落在正确度验证区间内;准确度:2022 年 10月份上报的 5 份 标本室间质评结果回报均通过国家临床检验中心室间质评标准,成绩为 1 00;稀释度偏倚在 1 ∶5 0 倍稀释时 为±7.2%,1∶1 00 倍稀释时为±7.4%,均<±10%（1/3Tea）;线性范围:线性理论值与实测值相关系数（r）均>0.975，斜率在0.95-1.050;携带污染率为 0.0 4%,不会产生假阳性结果;与西门子特定蛋白仪的CRP结果进行比较，在0-350.00 mg/L范围内，r>0.975；使用江苏临检中心发放的定值分别为12.11 mg/L和30.29 mg/L的正确度能力验证，通过正确度验证。结论 基蛋生物MAGICL6000全自动化学发光分析仪各参数性能验证均符合要求,可以投入临床实验室使用。
关键词: 器基蛋生物MAGICL6000全自动化学发光分析仪; C-反应蛋白；性能评价
CRP由肝细胞合成，在胎儿期产生，非母体胎盘传递。产生机理是：当机体受感染或组织受损伤时巨噬细胞和其他白细胞等被激活，产生白细胞介素-6、白细胞介素-1、肿瘤坏死因子TNF-a等细胞因分子和其他介导物，这些细胞因子和介导物到达肝脏，刺激肝细胞和上皮细胞合成CRP，是一种典型的急性时相反应蛋白［1］，常用于多种疾病诸如炎症、感染、组织损伤、恶性肿瘤等诊治的辅助诊断［2、3］辅助临床诊断感染使用最频繁和悠久的指标之一［4］，由于C反应蛋白会受到多种非感染因素的干扰，会给临床带来一定困扰，如创伤就可引起CRP升高，因此其特异性不强，但该指标与感染的严重程度成正相关关系。CRP作为炎症指标，在一定程度上可以辅助鉴别细菌感染和病毒感染，CRP一般在细菌感染后升高明显，而大多数病毒感染CRP并不高，不过也有例外，例如患者感染病毒性脑膜炎时，CRP明显升高，第七版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》指出多数患者外周血CRP升高，其进行性上升是重型、危重型患者的临床预警指标［5］。CRP 10-25mg/L提示病毒感染，如病程短，不能排除细菌感染，数小时后复查；CRP25-50mg/L提示细菌或病毒感染；50-100mg/L提示细菌感染，病毒感染不常见［6］。常规CRP测定参考值通常被认为是临床上含量高于10mg/L，在健康人群血液中CRP水平低于5mg/L，常规CRP作为急性炎症评估指标比红细胞沉降率（ESR）和白细胞计数更敏感、更可靠。当前国内检测CRP方法很多,目前临床常见的检测方法有胶体金法、免疫荧光法、化学发光法、免疫比浊法、胶乳增强免疫比浊法等，检测结果一致性化现状不很理想，不同实验室检测系统CV%差别较大［7］，MAGICL6000全自动化学发光采用双抗体夹心法进行检测。本研究依据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP系 列文件及原中华人民共和国卫生部相关文件要求,全面评价 MAGICL6000全自动化学发光分析仪的检测性能,从而为临床感染性病例的诊治提供更为有效的数据支持。
1 材料与方法
1.1材料 参考区间验证标本选取 2022 年 3-1 0 月本院体检中心体检和门诊血常规标本80 份(其中男 性 40 份、女性 40 份,年龄 1～6 9 岁，白细胞均正常,排除感染性疾病和其他急慢性疾病，经 2 5 00×g 离心力离心 1 0 min 后备用。试验标本均为本实验室完成常规检测后的剩余标本进行，对患者无任何损害,且试验结果只用于比对研究,不作为辅助诊断依据,不会给受试者带来任何风险［8］。
1.2 仪器与试剂 评价仪器为基蛋生物MAGICL6000全主动化学发光 分析仪,检测系统已获得国家市场监督管理总局认可,校准品批号 LOT:2 5 044/ 6A,质 控 品 批 号 LOT:2 5 0 3 8B,试 剂 批 号 LOT: 2 5 204C;比对仪器为雷度 AQT9 0FLEX 免疫分析仪, 校准品批号 LOT:1 9 6 0 5,质 控 品 批 号 LOT:1 842 6/ 1 7 8 1 6,试剂批号 LOT:1 9 6 0 5。本评价所有试验均严格按 照仪器标准化操作程序文件操作,试验前所有质控均 参照《临床实验室定量测定室内质量控制指南:GB/ T2046 8-200 6》文件执行［9］,且均在控。
1.3 方法
1.3.1 精密度验证 按照 CLSI EP5-A3精密度评估方法，每天上午将每个水平的质控物质进行2次测试，作为第1批测试的结果［10］，至少间隔2h，再用每个水平的质控物进行2次测试，作为第二批测试的结果，再2批测试之间，至少测定10例患者样本，连续20d。如果有任何一次质控结果超出偏差限，调查原因并纠正，质控在允许范围内方可进行精密度评估测试，根据测试结果统计中间精密度。
2 个水平(低水平 1 和高水平 2 均接近医学决定水平)的患者血浆标本制备的质控血浆,每个水平各分装 5 管,冻存于-20 ℃以下,每天各解冻 1 管, 上机重复测定 3 次,每次间隔 2 h,共测 5 d。分别计算批内和批间精密度的变异系数(CV ),根据国家临床检验中心室间质评标准,检测系统不精密度 CV < 1/4 系统总误差(TEa )(±7.5%)
1.3.2 准确度验证 按照《能力验证规则:CNASRL02:20 1 8》［11］要求,本实验室参加国家临床检验中心2022年10月组织的第一次 CRP 室间质评,将其发放的 5 份室间质评物质在评价仪器上进行检测,以室间质评回报结果的靶值作为标准,验证该实验室检测结果是否在允许范围内。
1.3.3 正确度验证 据《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证:WS/T492-20 1 6》［12］标准进行正确度验证，将值为12.11/L和30.29/L的2个浓度水平（可报告范围内）的CRP血清样本，连续测定5天，每份标本每天测定2次［13］，测定均值、偏移值，如果实验室正确度验证物质测量偏移值≤正确度验证物质赋值的不确定度，则验证通过，无需计数验证区间;如果实验室正确度验证物质测量偏移值>正确度验证物质赋值的不确定度，则需计算此偏移值的验证区间并将其与赋值比较，如赋值在验证区间内，则验证通过，如赋值超出验证区间，则验证不通过。
1.3.4 线性范围验证 参考《WS/T420-2013临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》线性评估方法，用接近线性范围下限的低浓度样品，稀释成7个不同浓度梯度样本（100%、80%、60%、40%、20%、10%和0）［14］每个稀释浓度测试3次，采用CLSI EP6-A进行线性统计［15］。CRP线性较宽，分3段进行线性测试及统计，分为0.3-10.0、10.1-100.0和100.1-350.0mg/L。
1.3.5 携带污染率验证依据CLSI H26-A2携带污染率评估方法，选取高值CRP>80mg/L和低值CRP<10mg/L,连续测定3次高值后再连续测定3次低值，分别获 得结果 L1、L2、L3,代入公式(L1 -L3)/(H3 -L3)× 1 00%,计算其携带污染率［16］。
1.3.6不同仪器间比较 依据《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南:WS/T 40 7-20 1 2》［17］要求, 采用本实验室在用的西门子特定蛋白分析与 MAGICL6000全自动化学发光分析仪同时检测 80 例血浆标本, 按试剂说明书对CRP不同水平 (<10、 10～ 50、50～350mg/L )进行临床意义的划分,3个水平的血浆标本数均为 20 例,对MAGICL6000全自动化学发光分析仪试剂盒和对照试剂检测的 2 组数据结果进行相关性统计评价。
1.4 统计学处理 采用 SPSS2 2.0 统计软件进行数据分析。计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2 检验;线性及比对数据进行线性回归分析。以 P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 精密度验证结果 按照 EP5-A3方案要求,见表 1。
2.2 准确度验证结果2022年 10月上报的 5 份标本室间质评结果均通过国家临床检验中心室间质评标 准,检测结果均在允许范围内,成绩为 1 00%,见表 2。
2.3 正确度验证结果 均值为 8.11 mg/L,标准差 为 0.59 mg/L,临 界 值 为 4.98 mg/L,9 5% CI 为 2 7.48～2 8.74 mg/L,指定标准差为 1.6 mg/L,合成标 准 不 确 定 度 为1.6,测 量 不 确 定 度 验 证 限 为 2 2.8 7～3 3.3 5 mg/L,验证物质的水平均落在以上验 证区间内,仪器正确度通过验。
2.4 CRP检测系统线性理论值及实测值的r均>0.975，斜率在0.950-1.050
